人外周血NK细胞纯化、扩增及克隆化的初步探索

• 作者: 孙汭 张建华 张彩 徐彤 王君甫 田志刚
• 来源期刊: 上海免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: NK细胞 纯化 扩增 克隆
• 年，卷（期）: 2000,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 148-151
• 页数: 4页
• 分类号: R392.12
• 字数: 3666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2000.03.006

摘要

分别采用Panning法、补体裂解法、绵羊红细胞花环法、Percoll不连续密度梯度离心法对NK细胞进行纯化并以流式细胞仪检测其纯度和计数探索NK细胞的体外扩增条件,将纯化NK细胞经有限稀释,在饲养细胞、IL-2、PHA及LCM等培养条件下进行克隆化培养并进行鉴定.研究表明NK细胞的纯度由纯化前10%左右提高到30%～70%不等,以Percoll不连续密度梯度离心法所获纯度最高,约为70%.NK细胞的体外扩增在含有IL-2、PHA及条件培养基最显著.每96孔板可获4～16个CD3-CD56+NK细胞克隆,每96个克隆的细胞数最多可达2.35×105.