Tec 家族蛋白酪氨酸激酶Itk PH结构域的克隆鉴定及其在酵母双杂交系统中自激活作用的检测

• 作者: 刘新平 张晓光 杨敏 白玉杰 聂小燕 苏成芝 药立波 韩月恒
• 来源期刊: 上海免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Itk PH结构域 酵母双杂交系统 自激活作用
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 88-91
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3201字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2000.02.007

摘要

Tec家族蛋白酪氨酸激酶Itk特异地表达于T细胞,对T细胞的成熟与活化等具有很大影响,因而可能在T细胞的信号转导过程中处于重要位置.我们利用PCR的方法从含Itk基因全长cDNA的pME18S-EMT质粒中扩增出其PH结构域基因片段,并将其克隆人酵母双杂交载体pLexA,经测序鉴定正确,转化酵母细胞EGY48(p8op-lacZ),挑取阳性克隆,利用液相法和平板法检测,证实PH结构域无自激活作用,且对宿主菌无毒性作用,可用于T细胞cDNA文库的筛选,捕捉与之相互作用的蛋白.