人干细胞因子（SCF）5’旁侧调控序列与其全长cDNA融合克隆的构建及鉴定

• 作者: 彭兴华 谭文斌 谭运年
• 来源期刊: 广东医科大学学报
• 关键词: 人干细胞因子 调控序列 cDNA 融合克隆
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 6-9
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|Q523
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4057.2001.01.003

摘要

目的：为研究人干细胞因子（SCF）5’旁侧1.42 kb区域内不同序列对全长cDNA在真核细胞中表达的调控作用，构建了SCF5’旁侧1．42 kb的调控序列与其1．2 kb的全长cDNA融合克隆。方法：将PCR获得的SCF5’旁侧1．42 kb的调控序列与RT-PCR获得的其1．2 kb的全长cDNA克隆入pGEM-T载体，筛选正确插入方向，利用合适的限制性内切酶从中切出三个片段依次亚克隆入pUC19克隆载体中。结果：获得了SCF5’旁侧 1．42 kb的调控序列与其1．2 kb的全长cDNA并成功地构建了它们的融合克隆。结论：T-载体在克隆添加了少量具有3’→5’外切核酸酶的PCR产物中仍然有效；在稍大片段的基因克隆操作中，利用分段亚克隆的方法，避开干扰另外的酶切位点，依次分段亚克隆更为可行。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭运年	广东医学院附属医院妇产科研究室	4	5	2.0	2.0
2	谭文斌	湖南医科大学分子生物学研究中心	8	18	3.0	3.0
3	彭兴华	湖南医科大学分子生物学研究中心	6	21	2.0	4.0