肺炎支原体P1蛋白结构基因片段的制备及C末端基因片段克隆的研究

• 作者: 刘忠顺 李保强 王桂珍 董占双
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎支原体 P1蛋白基因 基因克隆
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 34-36
• 页数: 3页
• 分类号: R375
• 字数: 2067字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2001.03.010

摘要

目的制备肺炎支原体P1蛋白结构基因，并在大肠杆菌中克隆肺炎支原体P1蛋白C末端基因片段，为P1蛋白基因片段的扩增、表达及探讨C末端基因片段功能打基础。方法 PCR扩增方法获取P1结构基因。扩增产物用P1蛋白基因特异引物扩增鉴定。用Sal Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶酶切消化方法制备P1蛋白C末端基因片段，并与pUC19 DNA连接，转入大肠杆菌JM109菌株。用X-gal 平板及质粒图谱分析方法筛选重组克隆株，再用限制性核酸内切酶酶切图谱分析鉴定。结果经PCR扩增MP DNA 获得一条5.0 kb DNA片段，用P1基因区特异引物扩增鉴定获得阳性结果。重组质粒限制性内切酶指纹图谱显示出两条带，一条为pUC19 载体 DNA带，另一条是1 kb的插入片段。结论获得肺炎支原体P1蛋白结构基因及含P1蛋白C末端DNA片段的重组克隆株。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王桂珍	中国医科大学基础医学院病原生物学教研室	33	103	6.0	8.0
2	李保强		7	10	2.0	3.0
3	董占双	中国医科大学基础医学院病原生物学教研室	13	52	3.0	7.0
4	刘忠顺	中国医科大学基础医学院病原生物学教研室	8	13	2.0	3.0