肺炎支原体P1蛋白羧基端基因片段的克隆及原核表达

• 作者: 刘小聪 孙新城 李恒思 李玉林 王云龙 王国强 王继创 程蕾 董彩文 邓黎黎
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 肺炎支原体 P1蛋白 套式PCR 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 45-48
• 分类号: S852.62
• 字数: 3027字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2012.06.010

摘要

根据GenBank公布的肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1蛋白羧基端序列(AF290001.1),设计合成2对特异性引物,采取套式PCR方法,以肺炎支原体培养物中提取的DNA为模板,扩增肺炎支原体P1蛋白羧基端基因序列,将其克隆至pET32a表达载体,构建重组质粒pET32a/P1(3 802 ～4 695),转化大肠埃希菌BL21-gold,测序验证后IPTG诱导表达,经SDS-PAGE表明重组蛋白表观分子质量与预期一致,可溶性表达产物经Western blot证实重组蛋白具有免疫反应性.