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摘要:
目的 将IL-10基因定向克隆入pEGFP-N2质粒,探讨采用构建的质粒转染支气管上皮细胞H292株,稳定表达IL-10和荧光蛋白可行性。方法 采用定向克隆技术,将IL-10基因克隆入pEGFP-N2质粒,用构建成功的IL-10--pEGFP-N2质粒在Fuge-6介导下转染培养的支气管上皮细胞株(H292),利用免疫组化、RT-PCR检测细胞中IL-10蛋白和mRNA的表达,并在荧光显微镜下观察荧光蛋白表达。结果 ①重组后的pEGFP-N2质粒已成功载入IL-10基因。②IL-10--pEGFP-N2 质粒转染支气管上皮细胞H292株后,可在H292株内表达IL-10mRNA、IL-10蛋白和荧光蛋白。结论 重组的IL-10--pEGFP-N2质粒可在上皮细胞内表达IL-10和荧光蛋白。由于两者共用一个启动子,荧光蛋白表达可报告IL-10表达,适用于动物实验气道内的IL-10转基因研究。
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文献信息
篇名 重组白细胞介素10-pEGFP-N2质粒构建及表达
来源期刊 第三军医大学学报 学科 医学
关键词 白细胞介素10 转基因 支气管上皮细胞株H292 荧光蛋白
年,卷(期) 2001,(2) 所属期刊栏目 技术方法
研究方向 页码范围 241-243
页数 3页 分类号 R392.2
字数 2812字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-5404.2001.02.041
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 程远雄 3 28 1.0 3.0
2 钟南山 136 1850 27.0 35.0
传播情况
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研究主题发展历程
节点文献
白细胞介素10
转基因
支气管上皮细胞株H292
荧光蛋白
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
第三军医大学学报
半月刊
1000-5404
50-1126/R
大16开
重庆市沙坪坝区高滩岩30号
78-91
1979
chi
出版文献量(篇)
15739
总下载数(次)
28
总被引数(次)
97850
论文1v1指导