微型双功能抗体抗CD3/抗CD20的构建和表达

• 作者: 彭晖 朱祯平 杨纯正 杨铭 熊冬生 范冬梅 许元富 赖增祖 邵晓枫
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单克隆抗体 CD3 CD20 基因工程抗体 双功能抗体
• 年，卷（期）: 2001,（7）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 339-342，347
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3776字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建和表达抗CD3/抗CD20微型双功能抗体，并测定该微型双功能抗体的生物学活性。方法：采用PCR和overlap PCR方法构建抗CD3/抗CD20微型双功能抗体，并用双脱氧终止法测定DNA序列；采用亲和层析法纯化该产物，并用Western blot和分子排阻层析鉴定纯化产物；采用FACS法和玫瑰花环试验鉴定纯化产物与靶细胞的结合活性。结果：DNA序列测定结果表明：抗CD3/抗CD20微型双功能抗体已构建成功，表达可溶性产物的产量达1 mg/ml以上，纯化产物中二聚体的比例达90%，具有与Jurkat(CD3+)和Daudi细胞(CD20+)结合的活性，且能同时与Jurkat和Daudi细胞结合形成玫瑰花环。结论：利用Diabody形式，首次成功地构建了抗CD3/抗CD20微型双功能抗体，并获得较高表达，表达产物具有与相应2个靶抗原结合的活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊冬生	中国医学科学院中国协和医科大学	20	90	6.0	8.0
2	许元富	中国医学科学院中国协和医科大学	14	80	5.0	8.0
3	杨纯正	中国医学科学院中国协和医科大学	42	433	11.0	19.0
4	彭晖	中国医学科学院中国协和医科大学	6	32	3.0	5.0
5	邵晓枫	中国医学科学院中国协和医科大学	8	40	3.0	6.0
6	赖增祖	中国医学科学院中国协和医科大学	4	29	3.0	4.0
7	范冬梅	中国医学科学院中国协和医科大学	4	14	3.0	3.0
8	杨铭	中国医学科学院中国协和医科大学	10	21	3.0	4.0
9	朱祯平	中国医学科学院中国协和医科大学	5	32	3.0	5.0