抗P选择素免疫小鼠单链抗体噬菌体展示文库的构建和筛选

• 作者: 安广宇 江淼 董宁征 阮长耿
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 活化血小板 单链抗体(ScFv) 噬菌体抗体库
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 119-122
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3697字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2002.02.011

摘要

目的构建抗P-选择素的全套单链抗体噬菌体表面展示文库,从中筛选与P-选择素高亲合力的单链抗体,为其临床应用奠定基础.方法从P-选择素免疫的小鼠脾淋巴细胞中提取总RNA,反转录成cDNA后,用抗体可变区混合引物扩增全套轻、重链可变区基因,经重叠延伸反应,装配成单链抗体(ScFv) 基因,将其克隆到噬菌体载体pHEN1中,构建单链抗体噬菌体抗体库.对抗体库进行亲合筛选后, ELISA法鉴定抗活化血小板单链抗体.结果经过5轮"吸附-洗脱-扩增"的富集过程,phage-ELISA得到一个ELISA活性较高的与P-选择素结合的克隆.序列测定符合抗体可变区结构特点. 结论成功构建了全套抗P-选择素单链抗体噬菌体展示文库,并筛选得到具有P-选择素结合能力的单链抗体基因 .

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董宁征	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	42	164	7.0	11.0
2	阮长耿	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	188	746	13.0	17.0
3	江淼	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	17	42	4.0	5.0
4	安广宇	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	5	27	3.0	5.0