抗己烯雌酚噬菌体单链抗体库的构建

• 作者: 吴聪明 周玄 张素霞 张艳蓉 沈建忠
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 己烯雌酚 单链抗体 噬菌体展示技术
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 药物学
• 页码范围: 655-658
• 页数: 4页
• 分类号: S859.84
• 字数: 3154字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.07.019

摘要

利用噬菌体表面展示技术、绕过杂交瘤技术,提取经DES-BSA免疫的BALB/c小鼠脾细胞总RNA,用相应引物扩增小鼠免疫球蛋白VH基因和VL基因,构建VH、VL抗体库.通过重叠延伸PCR(SOE-PCR),以(Gly4Ser)3为连接肽,将VH基因和VL基因连接成VH-Linker-VL,在Sfi Ⅰ+Not Ⅰ酶切位点定向插入pCANTAB-5E噬菌体载体,转化大肠杆菌TG1后,经M13K07辅助噬菌体拯救,构建成了全套抗己烯雌酚单链抗体表面展示文库.噬菌体中scFv基因的插入率为87.5%,经M13K07超感染后,其噬斑计数的效价为2.2×1011PFU/mL.结果表明,抗己烯雌酚的单链抗体库的构建,为进一步富集筛选并表达己烯雌酚单链抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张素霞	中国农业大学动物医学院	54	750	16.0	25.0
2	沈建忠	中国农业大学动物医学院	193	2889	31.0	42.0
3	吴聪明	中国农业大学动物医学院	65	634	14.0	21.0
4	周玄	中国农业大学动物医学院	3	14	2.0	3.0
5	张艳蓉	中国农业大学动物医学院	1	2	1.0	1.0