尘肺病噬菌体单链抗体库的构建及鉴定

• 作者: 姚武 翟伟 郝长付 高彬
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 尘肺 噬菌体单链抗体库 单链抗体
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 852-855
• 分类号: R135.2
• 字数: 2758字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2011.06.012

摘要

目的:构建具有良好多样性的人尘肺病噬菌体单链抗体( ScFv)库.方法:收集25例尘肺病患者外周血标本共50 mL,密度梯度离心法分离淋巴细胞,Trizol法提取总RNA,逆转录后参考文献设计并合成半巢式PCR引物,扩增抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,Linker连接VH和VL,继而连接到噬菌体载体pCANTAB-SE中,连接产物转入感受态大肠杆菌TG1,超感染辅助噬菌体M13KO7,构建噬菌体ScFv库.结果:扩增出VH和VL基因序列并有效地连接,经转化和超感染,构建了库容为2.4x107pfu/mL的ScFV库.结论:成功构建人尘肺病噬菌体ScFV库.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚武	郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室	105	506	12.0	17.0
2	翟伟	郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室	9	22	3.0	4.0
3	郝长付	郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室	44	159	7.0	10.0
4	高彬	郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室	4	73	3.0	4.0