荧光定量RT-PCR检测人组织因子 mRNA

• 作者: 关明 吕元 苏兵
• 来源期刊: 复旦学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 组织因子 反转录-聚合酶链反应 细胞株
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 方法技术
• 页码范围: 66-68,74
• 页数: 4页
• 分类号: R446
• 字数: 3428字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-8467.2002.01.020

摘要

目的建立检测组织因子(tissue factor,TF)mRNA荧光定量的方法,了解组织中TF的表达水平,研究TFmRNA的表达与肿瘤的关系.方法构建克隆载体pUC-TF作为定量模板,在GeneAmp 5700型检测仪上定量检测42例不同恶性程度胶质瘤组织标本,5例正常脑组织标本和人恶性胶质瘤细胞株U 251.结果42例肿瘤组织均有mRNA的表达,范围从3.6×105～8.8×107拷贝/μgRNA,均值为2.9×106拷贝/μg RNA,且拷贝数与恶性程度成正比;5例正常脑组织中,1例检测不出,其他4例的强度为3 8×103～5.l×104拷贝/μgRNA,均值为6.2×103拷贝/μg RNA;胶质瘤细胞株U-251的强度为2 8×106拷贝/μg RNA.结论成功地建立了荧光定量检测TF基因表达方法,检测结果可用绝对拷贝数表示,定量准确可靠.TF mRNA荧光定量测定方法的建立为研究TF与胶质瘤等肿瘤恶性程度及转移的关系打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏兵	复旦大学附属华山医院检验科	14	59	5.0	7.0
2	关明	复旦大学附属华山医院检验科	105	460	10.0	15.0
3	吕元	复旦大学附属华山医院检验科	65	447	12.0	18.0