炭疽芽孢杆菌防污染PCR-微孔板杂交-EIA检测技术的研究

• 作者: 宋亚军 张敏丽 杜宗敏 杨瑞馥 王津 翟俊辉 郭兆彪
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: PCR 炭疽芽孢杆菌 芽孢 检测 微孔板杂交 防污染
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: R378.72
• 字数: 3986字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2002.01.002

摘要

目的:建立防污染PCR-微孔板杂交-EIA检测技术,并用于炭疽芽孢杆菌芽孢的检测.方法:根据炭疽芽孢杆菌毒力相关基因设计引物,筛选合适引物,建立用UDG酶防污染的PCR扩增-微孔板杂交与酶联显色检测炭疽芽孢杆菌的方法,并探讨试剂的室温稳定系统,将建立的方法用于模拟污染炭疽芽孢土壤样品的检测.结果:根据炭疽芽孢杆菌荚膜和水肿因子基因设计的引物,可以同时检测两个毒力相关质粒的存在,用0.1?U的UDG可以防止1010产物的污染,微孔板杂交-酶联显色检测比单纯PCR-电泳敏感10倍.加入稳定剂的PCR-微孔板杂交-EIA体系可以耐受7?d的37℃破坏试验.将该体系用于污染土壤的检测,可以检测出0.25?g土壤中103个炭疽芽孢的存在.结论:所研制的防污染PCR-微孔板杂交-EIA试剂克服了目前PCR试剂运输不便,产物污染所致假阳性和判定结果欠客观的缺点,为炭疽芽孢的快速检测提供了有力手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翟俊辉	军事医学科学院微生物流行病研究所	27	568	14.0	23.0
2	杨瑞馥	军事医学科学院微生物流行病研究所	180	1706	21.0	33.0
3	张敏丽	军事医学科学院微生物流行病研究所	38	388	12.0	18.0
4	郭兆彪	军事医学科学院微生物流行病研究所	47	474	13.0	20.0
5	王津	军事医学科学院微生物流行病研究所	30	378	11.0	18.0
6	宋亚军	军事医学科学院微生物流行病研究所	41	437	13.0	19.0
7	杜宗敏	军事医学科学院微生物流行病研究所	9	156	6.0	9.0