阔叶榧总DNA的提取及其RAPD反应条件的研究

• 作者: 叶冰莹 庄振宏 朱锦懋 林荣华 陈由强
• 来源期刊: 厦门大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 阔叶榧 DNA提取 限制性内切酶酶切 RAPD 反应条件
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 683-686
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2960字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-0479.2002.05.031

摘要

在阔叶榧新鲜针叶DNA提取过程中,应用pH值较低,无机盐浓度较高的提取缓冲液可沉淀蛋白质,其中加入2%的β-巯基乙醇可有效地防止次生代谢物质使DNA变色.提取出的DNA样品产率在83.7～197.5 ng/mg.f.,DNA质量和纯度较高,260 nm/280 nm光密度比值在1.8～1.9之间.所得DNA可直接用于限制性内切酶酶切,并可用于随机引物PCR扩增.在优化RAPD各种反应条件研究中,确定了阔叶榧最佳RAPD反应体系为:15 μL反应体系中含有50 mmol/L KCl、10 mmol/L Tris-HCl (pH 9.0)、0.1% Triton-100、3 nmol/μL MgCl2、0.6 nmol/μL dNTPs、6 μg/μL BSA、1 U Taq酶、60 ng引物、50～100 ng左右的阔叶榧DNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱锦懋	福建师范大学生物工程学院	52	862	18.0	27.0
2	陈由强	福建师范大学生物工程学院	103	1191	20.0	29.0
3	叶冰莹	福建师范大学生物工程学院	45	763	17.0	26.0
4	庄振宏	福建师范大学生物工程学院	5	107	4.0	5.0
5	林荣华	福建师范大学生物工程学院	23	156	8.0	12.0