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重组人可溶性B淋巴细胞刺激因子及其突变体的克隆、表达及活性测定
重组人可溶性B淋巴细胞刺激因子及其突变体的克隆、表达及活性测定
作者:
彭善云
王嘉玺
邹民吉
陈光宇
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
hsBLyS
突变体
原核表达
包涵体
细胞增殖
摘要:
采用RT-PCR方法从人外周血白细胞总RNA中钓取人可溶性B淋巴细胞刺激因子(human soluble B lymphocyte stimulator, hsBLyS)的cDNA片段, 再运用基因重组手段, 利用通用型质粒pBV220构建表达载体pBV220/hsBLyS. 经测序鉴定后, 以之为模板使用重叠PCR法扩增得到hsBLyS的两个点突变体hsBY-A(Cys146→Ala146) 和hsBY-V (Cys146→Val146)的基因片段, 构建表达载体pBV220/hsBY-A及pBV220/hsBY-V. 经测序无误后, 将上述3种载体分别转化大肠杆菌DH5α并诱导重组蛋白质表达, 薄层扫描结果显示3种蛋白质在DH5α中表达量都在20%~30%之间. 再分别运用变性、 凝胶过滤层析及复性等手段纯化目的蛋白质, 最后通过B淋巴细胞增殖实验检测纯化产物促人B细胞增殖的活性. 实验结果表明, 3种重组蛋白质都能明显刺激人B细胞增殖; 统计学检验显示, 突变体rhsBY-V较野生型rhsBLyS的促人B淋巴细胞增殖活性显著增强.
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文献信息
篇名
重组人可溶性B淋巴细胞刺激因子及其突变体的克隆、表达及活性测定
来源期刊
生物化学与生物物理学报
学科
生物学
关键词
hsBLyS
突变体
原核表达
包涵体
细胞增殖
年,卷(期)
2002,(6)
所属期刊栏目
研究论文
研究方向
页码范围
731-736
页数
6页
分类号
Q78
字数
语种
英文
DOI
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
王嘉玺
军事医学科学院基础医学研究所
57
335
9.0
16.0
2
邹民吉
军事医学科学院基础医学研究所
39
238
6.0
14.0
3
陈光宇
军事医学科学院基础医学研究所
11
35
4.0
5.0
4
彭善云
军事医学科学院基础医学研究所
15
25
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hsBLyS
突变体
原核表达
包涵体
细胞增殖
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
生物化学与生物物理学报(英文版)
主办单位:
中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所
出版周期:
月刊
ISSN:
1672-9145
CN:
31-1940/Q
开本:
16开
出版地:
上海市岳阳路319号31-B
邮发代号:
4-210
创刊时间:
1961
语种:
eng
出版文献量(篇)
3098
总下载数(次)
1
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生物化学与生物物理学报(英文版)2001
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生物化学与生物物理学报(英文版)2002年第5期
生物化学与生物物理学报(英文版)2002年第4期
生物化学与生物物理学报(英文版)2002年第3期
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