双歧杆菌黏附素的提纯及鉴定

• 作者: 周殿元 潘令嘉 王立生 郑跃杰 郭立安 闫哲
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 2002,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1149-1151
• 页数: 3页
• 分类号: R57
• 字数: 2445字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2002.10.008

摘要

目的:双歧杆菌已广泛应用于益生菌及发酵乳的研制.由于双歧杆菌黏附于肠黏膜表面是其发挥作用的首要条件,开展对其黏附机制的研究有着重要意义.但目前有关双歧杆菌与肠黏膜上皮细胞的黏附机制所知不多,我们从青春型双歧杆菌中分离及纯化其黏附素.方法:黏附试验为检测青春型双歧杆菌与人肠上皮细胞系Lovo细胞间的黏附.收集双歧杆菌培养上清并用300 g/L硫酸铵沉淀,在4℃下8000r/min离心30min收集沉淀物.沉淀物溶解于0.01 mol/L pH7.4 PBS,加入至0.02 mol/LpH7.0 PBS平衡的Superdex 75柱中进行洗脱,速度为0.7mL/min,226 nm波长检测光密度ABS值.收集合并活性组分,冷冻干燥.干燥物溶解后加入至0.05 mol/L pH8.0PB平衡的Q-Sepharose FF柱中,先用同一缓冲液洗脱,然后分别用含0.1mol/L、0.3mol/L、0.5mol/L及1.0mol/L氯化钠的0.05 mol/L,PB进行阶段洗脱,速度为1.5 mL/min,检测各峰黏附活性,活性组分用SDS-PAGE进行分析.结果:使用硫酸铵沉淀对双歧杆菌黏附素进行了分离,沉淀物进一步经Superdex 75凝胶过滤和Q-SepharoseFF离子交换色谱纯化.结果黏附素不能结合与Q-Sepharose柱,经SDS-PAGE分析,证实纯化的黏附素成分基本单一,其M约为16ku.结论:双歧杆菌黏附素可能为一种M 16 ku的蛋白质,并且存在于培养液上清中.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑跃杰	深圳市儿童医院内科	165	1350	19.0	28.0
2	郭立安	第四军医大学基础部中心实验室	18	209	7.0	14.0
3	潘令嘉		2	23	2.0	2.0
4	周殿元		2	20	2.0	2.0
5	王立生		1	15	1.0	1.0
6	闫哲	第四军医大学基础部中心实验室	2	46	2.0	2.0