融合有HBV前S1(21～47)片段的HCV E2糖蛋白在CHO细胞中的表达和鉴定

• 作者: 刘晶 张祖传 朱立新 李光地 汪垣 王春林
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 (HCV) 乙型肝炎病毒(HBV) E2糖蛋白 前S1
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 400-404
• 页数: 5页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

在构建丙型肝炎病毒(HCV)被膜蛋白E2的CHO细胞稳定表达株时, 为了方便进行表达产物的检测和纯化, 将编码E2 N端277个氨基酸(384～661)的基因片段和编码乙型肝炎病毒前S1(21～47)区的基因融合, 一起插入分泌表达载体pSecTagB, 所得重组质粒转染的CHO细胞经Zeocin选择, 得到稳定细胞株CHO/sS1E2. 以E2和preS1特异的抗体进行免疫印迹分析, 从筛选到的稳定细胞株检测到了分泌的以及细胞内的表达产物. 用糖链类型特异的糖苷酶对表达产物进行了酶解分析, 发现绝大多数胞内的E2糖蛋白产物是高甘露糖型的, 而分泌的E2糖蛋白产物则绝大多数是复杂糖化的, 表明表达的E2在分泌过程中经历了高尔基体的进一步修饰. 初步的分析显示, 融合抗原能特异地和前S1抗体偶联的Sepharose结合, 并能被顺利地洗脱, 表明该免疫亲和介质能用于融合抗原的大规模制备. 为进一步研究HCV E2糖蛋白的免疫学性质以及重组的HBV/HCV双价疫苗创造了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪垣	中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室	22	63	4.0	7.0
2	李光地	中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室	9	18	1.0	4.0
3	王春林	中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室	9	179	5.0	9.0
4	刘晶	中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室	23	115	4.0	10.0
5	朱立新	中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室	8	18	3.0	4.0
6	张祖传	中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室	12	13	2.0	3.0