抗胶质瘤重组免疫毒素SZ39-PE40的原核表达、纯化及复性研究

• 作者: 王爱东 罗良生 黄强
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 胶质瘤 重组免疫毒素 变性 复性
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 355-358
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3932字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2002.04.015

摘要

目的构建抗胶质瘤重组免疫毒素SZ39-PE40基因并在大肠杆菌中表达.对主要以包涵体形式表达的产物进行变性和复性研究. 方法从质粒pVC85中克隆PE40基因,与抗胶质瘤的单链抗体(ScFv)-SZ39基因进行拼接,构建重组免疫毒素SZ39-PE40基因,并在大肠杆菌中表达.对表达产物(包涵体)进行分离、纯化、变性及复性处理后,以ELISA及免疫荧光技术,检查其对胶质瘤细胞的结合活性.结果 SDS-PAGE及Western blot分析显示,表达产物的相对分子质量(Mr)为68 000左右,与SZ39-PE40融合蛋白的理论推算值相符.凝胶灰度扫描显示,其表达量占菌体总蛋白的20%.ELISA及免疫荧光技术均证实,经复性的SZ39-PE40融合蛋白具有结合胶质瘤细胞SHG- 4的活性.结论成功地构建并在原核细胞中表达SZ39-PE40融合蛋白基因,复性的表达产物具有特异性识别胶质瘤细胞的活性,为进一步应用于胶质瘤的导向治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王爱东	苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室	70	388	12.0	15.0
2	黄强	苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室	207	1479	19.0	27.0
3	罗良生	苏州大学附属第二医院神经外科暨脑肿瘤研究室	5	13	3.0	3.0