巢式PCR快速检测炭疽芽孢杆菌

• 作者: 俞慕华 段永翔 温群文 陈昭斌 陈辉 黄锐敏
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 炭疽芽孢杆菌 巢氏PCR 水肿因子
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 772-773,778
• 页数: 3页
• 分类号: R115
• 字数: 2959字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-8507.2002.06.013

摘要

目的:快速简便地检测炭疽芽孢杆菌.方法:细菌培养物经反复冻融,SDS、蛋白酶K和煮沸处理后,作为PCR模板,根据炭疽芽孢杆菌质粒pX01中水肿因子(EF)基因设计两对引物,采用巢式PCR(nested PCR)扩增目的基因.结果:从炭疽芽孢杆菌模板中成功扩增出1247bp的特异片段,而未在炭疽芽孢杆菌无毒株、蜡样芽孢杆菌和枯草杆菌模板中扩增出相应条带;第一次扩增能检出的最低细菌量是103拷贝;经再次巢式PCR,扩增出208bp的特异片段,最低检出的细菌数为10个拷贝,敏感性提高了100倍.结论:巢式PCR是一种快速、特异、敏感的检测炭疽芽孢杆菌的方法.