抗血管性血友病因子A1区单链抗体噬菌体展示文库的构建和筛选

• 作者: 季顺东 江淼 王迎春 白霞 祝怀平 阮长耿
• 来源期刊: 上海免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: vWF 单链抗体(ScFv) 噬菌体抗体库
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 331-335
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3317字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2003.05.012

摘要

为构建抗人vWF-A1的全套单链抗体噬菌体表面展示文库,从中筛选与vWF-A1高亲合力的单链抗体,为其临床应用奠定基础.从vWF-A1免疫小鼠的脾淋巴细胞中提取总RNA,纯化mRNA并反转录成cDNA后,用抗体可变区混合引物扩增全套轻、重链可变区基因,经重叠延伸反应,在体外装配成单链抗体(ScFv),将其克隆至噬菌体载体pHEN1中,构建单链抗体噬菌体抗体库.对抗体库进行亲合筛选后,ELISA法鉴定抗vWF-A1单链抗体.结果经过5轮"吸附-洗脱-扩增"的富集过程,phage-ELISA筛选到与vWF-A1有高亲和力的克隆.序列测定符合抗体可变区结构特点.成功构建了全套抗vWF-A1单链抗体噬菌体展示文库,并筛选出具有结合vWF-A1功能的单链抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阮长耿	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	188	746	13.0	17.0
2	白霞	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	58	167	6.0	8.0
3	季顺东	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	28	94	5.0	8.0
4	祝怀平		24	78	5.0	7.0
5	王迎春	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	13	22	3.0	3.0
6	江淼	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	17	42	4.0	5.0