伪狂犬病毒gG基因的表达及gG-LAT诊断方法的建立

• 作者: 何启盖 唐勇 肖少波 覃雅丽 陈焕春
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: PRV gG基因表达 大肠杆菌 gG-ELISA gG-LAT
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 页码范围: 72-76
• 页数: 5页
• 分类号: S582.1
• 字数: 3535字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2003.01.015

摘要

依据伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus PRV)Rice株序列合成针对gG基因的特异性引物,从PRV鄂A株中扩增出gG基因,并将其克隆到pBluescriptⅡSK+质粒中并测序,用SacⅠ和HindⅢ酶切,将gG基因融合到pET-28a质粒中T7启动子下游,构建成原核表达质粒pET-28a-gG1,结果并未获得表达.再用NotⅠ切除gG基因后小半部分片段,构建成原核表达质粒pET-28a-gG2,使其在E.coli BL21(DE3)中以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析,表达特异带为47KDa,斑点杂交证实表达产物具有抗原性.表达产物主要以可溶性蛋白的形式存在于细菌裂解液的上清之中,上清经饱和硫酸铵溶液沉淀,透析,PEG20 000浓缩,ELISA分析表明,经初步纯化的表达产物可与抗PRV猪血清发生特异性免疫反应.用该产物致敏空白乳胶建立gG-乳胶凝集试验(gG-LAT),检测340份血清,结果表明gG-LAT能区分gG基因缺失疫苗活苗免疫猪与自然感染野毒的血清学阳性猪,且特异性强、敏感性高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈焕春	华中农业大学畜牧兽医学院	331	4866	36.0	53.0
2	何启盖	华中农业大学畜牧兽医学院	170	2510	25.0	42.0
3	肖少波	华中农业大学畜牧兽医学院	79	1105	19.0	30.0
4	唐勇	华中农业大学畜牧兽医学院	13	136	8.0	11.0
5	覃雅丽	华中农业大学畜牧兽医学院	9	238	8.0	9.0