酵母双杂交相关方法的改良及应用

• 作者: 余利红 尹昭云 廖志勇 张成岗 徐文琳 王新兴 王春丽 钱令嘉
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 酵母双杂交 阳性克隆 筛选 PCR
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 372-374
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 2617字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2003.05.006

摘要

对酵母双杂交实验过程中较为耗时的阳性克隆鉴定过程进行改进,以期建立一种快速有效的鉴定方法.分别采用液氮冻融法、超声破碎法、渗透压破壁法以及煮沸裂解法裂解酵母细胞,获得质粒作为PCR模板,直接测序鉴定筛选到的相互作用蛋白.以液氮冻融法和超声破碎法裂解细胞获得的质粒为模板进行PCR,得到特异的产物,测序鉴定结果明确,与经典的鉴定方法相比效果相当,但更加经济快捷;而渗透压破壁法和煮沸裂解法则效果不好.说明前两种方法可代替常规方法用于阳性克隆的鉴定,从而加快酵母双杂交实验中大量阳性克隆的筛查工作.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱令嘉		95	941	18.0	26.0
2	张成岗	军事医学科学院放射医学研究所	123	1156	18.0	28.0
3	尹昭云	军事医学科学院卫生学与环境医学研究所	33	297	10.0	16.0
4	徐文琳	军事医学科学院卫生学与环境医学研究所	5	74	4.0	5.0
5	王春丽	军事医学科学院放射医学研究所	7	222	6.0	7.0
6	王新兴	军事医学科学院卫生学与环境医学研究所	23	108	6.0	9.0
7	余利红	军事医学科学院放射医学研究所	5	34	3.0	5.0
8	廖志勇	军事医学科学院放射医学研究所	1	3	1.0	1.0