人PD-L1(B7-H1)基因克隆及其逆转录病毒载体的构建和稳定表达

• 作者: 古涛 孙建军 张学光 徐宽枫 施勤 李文香 葛彦 陈永井
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: PD-L1 逆转录病毒 稳定表达 筛选
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 110-114
• 页数: 5页
• 分类号: R373.9|Q785
• 字数: 3988字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2003.02.008

摘要

目的:克隆人PD-L1(B7-H1)基因,并构建含有该目的基因的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达PD-L1基因的L929细胞.方法:从人心脏cDNA文库中扩增出PD-L1基因,通过双酶切装入逆转录病毒载体pGEZ-Term中,脂质体法共转染包装细胞293T,用含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清感染L929细胞,72 h后,加入Zeocin进行筛选,挑选出能稳定表达PD-L1蛋白的L929细胞株.结果:构建了用于表达的含PD-L1基因的重组逆转录病毒载体;经转染包装细胞293T后,包装出具有感染能力的重组PD-L1逆转录病毒;经RT-PCR、流式细胞仪表型检测表明,筛选出的L929转基因细胞能稳定表达人PD-L1蛋白.结论:构建了含人PD-L1基因重组逆转录病毒载体和稳定表达人PD-L1蛋白的细胞株,为该基因功能的后续研究和单克隆抗体的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学光	苏州大学医学生物技术研究所	399	1957	18.0	24.0
2	施勤	苏州大学医学生物技术研究所	55	280	9.0	13.0
3	陈永井	苏州大学医学生物技术研究所	78	388	11.0	14.0
4	李文香	苏州大学医学生物技术研究所	14	63	4.0	7.0
5	孙建军	苏州大学医学生物技术研究所	8	90	5.0	8.0
6	葛彦	苏州大学医学生物技术研究所	21	100	6.0	9.0
7	古涛	苏州大学医学生物技术研究所	12	119	7.0	10.0
8	徐宽枫	苏州大学医学生物技术研究所	6	67	5.0	6.0