可示踪防龋基因疫苗的构建及其体外表达

• 作者: 刘莉 周绍兵 张再容 李学如 贾文祥 陈恬 马巨辉
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 绿荧光蛋白 防龋 基因疫苗 转染
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 174-176
• 页数: 3页
• 分类号: R78
• 字数: 2756字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1182.2003.03.002

摘要

目的构建一含绿荧光蛋白报告基因(gfp)的防龋基因疫苗,利用绿荧光蛋白特有的发光性质,示踪防龋基因疫苗在体外的表达情况.方法 采用PCR方法,以质粒pPC41为模板,扩增变形链球菌表面蛋白质抗原(PAC)分子的氨基端A区(pacA),以此作为基因防龋疫苗的目的基因片段,与质粒pEGFP-C1重组构建重组质粒pEGFPC1-pacA,并经酶切、测序鉴定;重组质粒瞬时转染COS1细胞后,通过荧光显微镜直接观察发绿色荧光的细胞,流式细胞仪检测转染细胞的荧光强度,RT-PCR扩增pacA基因片段检测重组质粒的体外表达情况.结果 重组质粒中的pacA片段完全来自pac全基因序列, pEGFPC1-pacA构建正确;荧光显微镜直接观察到了发绿色荧光的细胞,重组质粒转染细胞的荧光强度明显高于未转染细胞的荧光强度,并证实了重组质粒pacA片段能在哺乳动物细胞中被转录.结论 重组质粒中的绿荧光蛋白基因以及置于gfp基因之后的防龋基因片段均能在体外同时正确表达,为深入研究防龋基因疫苗的安全性及有效性提供了较好的材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周绍兵	中国科学院成都分院有机化学研究所	6	43	4.0	6.0