猪肌生成抑制素基因成熟蛋白编码序列表达载体的构建及其转录水平的检测

• 作者: 孙美榕 张玉静 张锐 杨捷 欧阳红生 陈绍红 黄燕
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 猪肌生成抑制素基因 表达载体 mRNA转录水平
• 年，卷（期）: 2003,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 22-26
• 页数: 5页
• 分类号: S828.91
• 字数: 2580字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2003.10.004

摘要

构建猪肌生成抑制素(MSTN)成熟蛋白编码序列的克隆与表达载体,并对mRNA进行转录水平的检测,为获得较好的猪肌生成抑制素抗原、制备抗体打下良好的基础.猪MSTN基因的cDNA去除信号肽后,用PCR扩增的1.2 kb目的片段与pMD18-T载体连接,将克隆载体的质粒DNA与同样用BamHⅠ和SalⅠ限制性内切酶酶解的表达载体pET28a(+)质粒定向连接,对筛选出的阳性克隆用酶切及测序法鉴定.对猪MSTN基因成熟蛋白编码序列进行反转录,对mRNA Northern杂交进行转录水平的检测.结果,所得到的序列与所设计的序列完全一致,表明成功地进行了猪MSTN基因编码序列的克隆及筛选;目的片段定向插入,阅读框架正确;RT-PCR成功地反转录得到约1.2 kb的目的DNA片段,Northern杂交后对mRNA印迹放射自显影,见到清晰的1.2 kb特异带.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张玉静	中国人民解放军军需大学生物化学与分子生物学教研室	21	133	5.0	11.0
2	张锐	湛江海洋大学现代生化中心	19	189	7.0	13.0
3	欧阳红生	中国人民解放军军需大学生物化学与分子生物学教研室	10	102	5.0	10.0
4	孙美榕		10	94	4.0	9.0
5	杨捷	湛江海洋大学现代生化中心	5	44	3.0	5.0
6	黄燕	湛江海洋大学现代生化中心	9	127	5.0	9.0
7	陈绍红	湛江海洋大学现代生化中心	20	268	10.0	16.0