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摘要:
目的构建人修复基因hMTH1反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-T.方法提取人胚肺成纤维细胞(HLF)总RNA,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增hMTH1基因cDNA保守序列,经pGEM-T载体克隆后双酶切,将cDNA保守序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-C1,构建hMTH1基因反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-T,并转染细胞.用Western-blot法检验载体抑制hMTH1蛋白表达的效率.结果经RT-PCR获得423bp产物,T载体克隆后,经DNA测序,确定该片段为hMTH1基因cDNA,进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-T,测序后确证.该载体转染细胞后,可使hMTH1蛋白水平 下降约46%.结论成功构建hMTH1基因反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-T.
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构建
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Mlo基因
pBI121Mlo
RT-PCR
反义片段
双酶切
内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 修复基因hMTH1反义RNA真核表达载体的构建
来源期刊 中华劳动卫生职业病杂志 学科 医学
关键词 遗传载体 RNA,反义 脱氧鸟嘌呤核苷酸类 GTP磷酸水解酶类
年,卷(期) 2003,(1) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 57-60
页数 4页 分类号 R3
字数 3112字 语种 中文
DOI 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2003.01.017
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 庄志雄 147 734 14.0 20.0
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研究主题发展历程
节点文献
遗传载体
RNA,反义
脱氧鸟嘌呤核苷酸类
GTP磷酸水解酶类
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华劳动卫生职业病杂志
月刊
1001-9391
12-1094/R
大16开
天津市河东区华越道6号
6-50
1983
chi
出版文献量(篇)
6593
总下载数(次)
17
总被引数(次)
33756
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