Survivin反义RNA真核表达载体的构建

• 作者: 文连姬 李长青 王丽华 管国芳 赵丹 金春顺 高丽芳
• 来源期刊: 中国耳鼻咽喉颅底外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 反义RNA Survivin 喉肿瘤/遗传学 肿瘤细胞 培养的
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 213-216
• 页数: 4页
• 分类号: R739.65|R73-351
• 字数: 3578字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-1520.2005.04.003

摘要

目的构建Survivin反义RNA表达载体,从基因水平靶向封闭Survivin功能,为探讨喉癌细胞凋亡和增殖的影响奠定基础.方法将Survivin大部分编码序列cDNA片段反向插入pEGFP-C1载体,构建Survivin反义RNA表达载体.用脂质体转染技术将重组质粒转染人喉癌细胞株Hep-2,并利用G418(300 mg/ml的维持浓度)筛选,获得稳定细胞株(命名为HpEGFP/Survivin).用蛋白免疫印迹Western-blot从蛋白质水平检测反义Survivin RNA封闭Survivin的表达效果.结果构建的Survivin反义RNA表达载体(命名为pEGFP/Survivin),经酶切电泳和测序证实碱基序列的正确性.蛋白免疫印迹Western-blot结果表明,构建的Survivin反义RNA表达载体转染人喉癌细胞株Hep-2,从蛋白水平抑制了Survivin的表达,抑制率为30%.说明反义Survivin RNA载体构建成功.结论构建的Survivin反义RNA表达载体从蛋白水平抑制了Survivin的表达,可以进一步用于抑制Survivin基因表达的实验研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金春顺	吉林大学第二医院耳鼻咽喉科	68	232	8.0	10.0
2	文连姬	吉林大学第二医院耳鼻咽喉科	45	104	5.0	7.0
3	王丽华	吉林大学基础医学院生化教研室	57	131	6.0	8.0
4	管国芳	吉林大学第二医院耳鼻咽喉科	41	134	6.0	9.0
5	李长青	吉林大学第二医院耳鼻咽喉科	17	62	5.0	7.0
6	赵丹	吉林大学基础医学院病理生理教研室	92	525	13.0	20.0
7	高丽芳	吉林大学基础医学院病理生理教研室	11	66	5.0	8.0