抗突变型p53 Maxizyme的体外转录和真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 孔心涓 宋宇虎 林菊生 沈霞
• 来源期刊: 郧阳医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Maxizyme 肝肿瘤 突变型p53
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 70-72
• 页数: 3页
• 分类号: Q782
• 字数: 1795字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-9674.2003.02.002

摘要

目的:构建抗突变型p53 Maxizyme(Mz)的体外转录和真核表达载体,为进一步探讨抗p53 Mz的体外切割作用和在细胞内对突变型p53的抑制作用打下了基础.方法:应用计算机设计针对肝癌细胞突变型p53(mtp53)249位密码子的Mz的基因片断(MzL和MzR),分别克隆入体外转录载体pBSKU6中,命名为pU6-MzL和pU6MzR.应用PCR技术使pU6-MzR的酶切位点改变,亚克隆入pU6-MzL中,重组质粒命名为pU6-Mz,同时构建靶基因mtp53的体外转录质粒.再将嵌U6中的Mz亚克隆入真核表达载体pEGFP中,构建真核重组质粒pEGFP-Mz,该质粒嵌于U6表达系统中,在体外由RNA聚合酶Ⅲ高效转录.结果:测序结果提示成功构建了Mz的体外转录和真核表达载体.结论:本研究成功构建了针对突变型 p53的Maxizyme的体外转录和真核表达载体,为进一步的体外实验和细胞内的研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林菊生	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所	113	535	12.0	17.0
2	孔心涓	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所	7	36	3.0	6.0
3	宋宇虎	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所	31	102	6.0	8.0
4	沈霞	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所	7	19	3.0	4.0