人3突变型低氧诱导因子1 α真核表达载体和腺病毒表达载体的构建及鉴定

• 作者: 刘城 吴平生 王月刚 童锴 胡英芳 谢宜军 赖艳娴 韦莉莉
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 低氧诱导因子-1α 基因治疗 血管新生 载体
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 临床医学
• 页码范围: 86-89
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2008.01.029

摘要

目的 为了深入研究人低氧诱导因子1α基因对冠心病的血管新生作用,构建人3突变型低氧诱导因子1α腺病毒表达栽体(pAdeno-HIF-1α-Ala402-Ala564-Ala803).方法 双酶切pShuttle2-HIF-1α-Ala402-AlaS64、pShuttle2-HIF-1α-Ala564-Ala803,凝胶回收前者酶切片段中大小为300 bp的小片段及后者酶切片段中大小为6 300 bp的大片段,并将两者连接,重组成3突变型穿梭质粒pShuttle2-HIF-1α-Ala402-Ala564-Ala803,并进行酶切和PCR鉴定.鉴定正确后,采用分子克隆技术,以PI-SceI和Ⅰ-CeuI双酶切重组3突变型穿梭载体,获得含有3突变型HIF-1α(pShuttle2-HIF-1α-Ala402-Ala564-Ala803)的表达盒,通过体外连接法与线性化的腺病毒骨架载体Adeno-XTM Viral DNA连接,重组成3突变型腺病毒我体(pAdeno-HIF-1α-Ala402-AlaS64-Ala803).再进行酶切及测序鉴定.结果 经酶切鉴定及基因测序证实重组3突变型真核表达载体和腺病毒表达载体质粒构建成功.结论成功构建重组人3突变型低氧诱导因子1α真核表达载体(pShuttle2-HIF-1α-Ala402-Ala564-Ala803)和人3突变型低氧诱导因子1α腺病毒表达载体(pAdeno-HIF-1α-Ala402-Ala564-Ala803).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴平生	南方医科大学南方医院心内科	131	614	13.0	18.0
2	刘城	南方医科大学南方医院心内科	10	40	4.0	6.0
3	王月刚	南方医科大学南方医院心内科	48	237	8.0	12.0
4	谢宜军	南方医科大学南方医院心内科	9	33	3.0	5.0
5	胡英芳	南方医科大学南方医院心内科	8	32	4.0	5.0
6	童锴	南方医科大学南方医院心内科	7	22	3.0	4.0
7	赖艳娴	南方医科大学南方医院心内科	5	25	3.0	5.0
8	韦莉莉	南方医科大学南方医院心内科	5	23	3.0	4.0