血管内皮细胞生长因子真核表达质粒的构建及其在心肌细胞中的表达

• 作者: 吕安林 张荣庆 易甫 贾国良
• 来源期刊: 心脏杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 血管内皮细胞生长因子 真核表达载体 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 218-222
• 页数: 5页
• 分类号: Q58
• 字数: 5128字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-7236.2003.03.009

摘要

目的:构建血管内皮细胞生长因子(VEGF165)真核表达质粒pcDNA3.1(-)/h VEGF165,并通过转染心肌细胞来验证其生物活性. 方法:应用DNA重组方法,将编码h VEGF165全长cDNA克隆于真核表达载体pcDNA3.1(-)中,构建pcDNA3.1(-)/h VEGF165真核表达质粒;应用阳性脂质体介导的基因转染技术,将真核表达质粒pcDNA3.1(-)/h VEGF165瞬时转染培养的大鼠心肌细胞中;采用RT-PCR,ELISA,Western blot及免疫组化染色等方法检测VEGF165基因在心肌细胞中的表达情况;应用MTT法检测转染后细胞上清液中VEGF165的生物活性. 结果:将构建好的真核表达质粒pcDNA3.1(-)/h VEGF165转染心肌细胞后,VEGF mRNA及蛋白表达水平明显增高,转染后的心肌细胞培养上清液具有促使内皮细胞增殖的生物活性. 结论:成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1(-)/h VEGF165,其转染心肌细胞后可获得较高水平VEGF蛋白的表达,所表达出VEGF蛋白具有生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	易甫	第四军医大学西京医院心内科	38	134	5.0	11.0
2	贾国良	第四军医大学西京医院心内科	333	2140	20.0	28.0
3	吕安林	第四军医大学西京医院心内科	108	588	12.0	18.0
4	张荣庆	第四军医大学西京医院心内科	141	706	13.0	16.0