抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体SZ-2单链抗体的构建、表达及功能研究

• 作者: 戴克胜 祝怀平 阮长耿
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单链抗体 单克隆抗体 血小板
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 243-247，252
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4519字
• 语种: 中文

摘要

目的:降低鼠源性抗体的免疫原性及分子量,为其进一步研究、应用奠定基础.方法:应用RT-PCR技术,克隆SZ-2重链、轻链可变基因.应用基因重组技术构建SZ-2单链抗体表达载体pET22-2scFv,导入大肠杆菌BL21(DE3)Plys,诱导表达.流式细胞术、ELISA、Western blot检测SZ-2 scFv与血小板结合能力,瑞斯托霉素、凝血酶和ADP诱导血小板聚集试验对表达产物功能进行研究.结果:克隆基因序列符合小鼠轻、重链可变区基因特征;pET22-2scFv表达质粒拼接正确;表达产物以包涵体形式为主,表达量占菌体总蛋白的25%;纯化、复性后证明表达产物具有与血小板结合的活性,并可抑制瑞斯托霉素、凝血酶诱导的血小板聚集.结论:成功表达了SZ-2单链抗体,该小分子抗体具有与血小板结合的活性,并可抑制瑞斯托霉素、凝血酶诱导的血小板聚集.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	祝怀平	苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所	7	27	3.0	5.0
2	戴克胜		1	14	1.0	1.0
3	阮长耿		1	14	1.0	1.0