传染性法氏囊病毒VP2在酵母细胞内的高效表达及其免疫原性研究

• 作者: 付朝阳 张守发 曾祥伟 王牟平 王笑梅 高宏雷
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 传染性法氏囊病病毒 VP2 酵母表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·资源昆虫
• 页码范围: 443-447
• 页数: 5页
• 分类号: Q95
• 字数: 3531字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2003.04.017

摘要

应用Pichia酵母表达系统高效表达了传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2基因片段.首先用OLIGO设计1对引物P5、P6,以插入IBDV VP2基因的pUC19为模板,扩增出带有终止密码子的1.5kb片段,将此片段正向亚克隆到pPICZA表达载体上,将构建好的载体pPICVP2用SacI内切酶线性化后,转染酵母Pichia pastoris GS115细胞,经PCR鉴定,筛选出50多个重组子.分别用甲醇诱导后,经SDS-PAGE凝胶电泳、琼脂扩散试验、Dot-ELISA检测,得到9个不同程度表达41ku VP2活性蛋白的阳性重组子.经凝胶薄层扫描仪分析,表达蛋白占酵母细胞总蛋白的最高比率为16%,表达量为0.6208 g@L-1.表达产物免疫SPF鸡可诱导产生特异性抗体,并能保护鸡抵抗超强毒致死性攻击,具有良好的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张守发	延边大学农学院	147	901	14.0	24.0
2	王笑梅	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	65	361	12.0	16.0
3	高宏雷	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	29	190	8.0	13.0
4	付朝阳	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	28	381	10.0	19.0
5	王牟平	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	13	216	7.0	13.0
6	曾祥伟	东北农业大学动物医学院	11	102	7.0	10.0