大肠杆菌tyrR基因对aroP的表达调控

• 作者: 刘东信 吴永庆 商量 江培翃 王建刚 范长胜 金瑞良
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 医学
• 关键词: tyrR aroP 代谢调控 苯丙氨酸运输
• 年，卷（期）: 2003,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 993-997
• 页数: 5页
• 分类号: R37
• 语种: 英文

摘要

大肠杆菌的tyrR基因编码芳香氨基酸生物合成和运输途径中的一种全局性调控蛋白质, 该蛋白质控制着包括自身编码基因tyrR在内的涉及苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸合成与运输的8个转录单位的转录. 大肠杆菌aroP基因编码一种跨质膜主动运输芳香氨基酸的透性酶, 其转录也受TyrR蛋白抑制. 利用PCR反应从E. coli K12基因组中分别克隆了aroP(p) 基因(携带自身的启动子)、 aroP基因(不携带自身的启动子)和tyrR基因, 并将它们导入苯丙氨酸生产菌E. coli WT5中. 通过大细胞法检测到这3个基因的表达, 并分别测定了相应的酶活力. 结果发现导入aroP(p)和aroP基因的大肠杆菌吸收苯丙氨酸的能力分别提高到原来的1.40和1.46倍, 这表明利用pλPR 质粒能够表达aroP基因, 该质粒中的λ右向启动子(PR)和aroP自身启动子(p) 的表达效率几乎同样; 导入tyrR基因的E. coli WT5 ATP酶活力提高到原来的1.69倍. 将两种基因串联克隆在同一质粒中共表达时, 携带aroP-tyrR串联的大肠杆菌株运输苯丙氨酸的能力明显高于携带aroP(p)-tyrR串联的大肠杆菌株. 以E. coli WT5为对照, 其AroP的活性定为1, 前者的AroP相对酶活力为1.31, 后者为0.95, 这一结果显示TyrR蛋白可能是通过与aroP基因自身启动子的结合作用来负调控aroP基因的表达.