生物工程技术制备人源抗-HBs Fab 片段

• 作者: 安峰 陆慧琦 陈玉川 韩焕兴
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Fab片段 六聚组氨酸尾 亲和层析
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 74-76
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3628字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2003.01.025

摘要

目的: 用生物工程技术制备人源性抗-HBs Fab.方法: 将从抗体文库中筛选出的人源抗-HBs Fab基因克隆入pBAD/g ⅢA载体, 进而转化Top10大肠杆菌.对重组质粒菌发酵表达后, 利用Ni-NTA-Agarose螯合层析柱纯化周质腔可溶性Fab蛋白.对所得包涵体依次变性、溶解、纯化后, 利用透析进行复性.用Western blot检测Fab蛋白的特异性, Dot blot测定其生物学活性.结果: 经Ni-NTA-Agarose柱纯化的周质腔可溶性Fab蛋白, 有较好的生物学活性, 并且总量达到80 mg/L.对所获包涵体进行透析复性后, 也可得到少量有活性的蛋白, 但比例很小.结论: 用pBAD/g ⅢA-Top10表达系统表达人源抗-HBs Fab片段, 发酵培养后, 经有效纯化可得到生物学活性较好的可溶性蛋白, 为人源抗-HBs Fab片段的大量制备提供了有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩焕兴	第二军医大学长征医院临床免疫中心	47	148	7.0	10.0
2	陆慧琦	第二军医大学长征医院临床免疫中心	38	118	6.0	9.0
3	陈玉川	中山大学中山医学院法医病理学教研室	38	321	11.0	15.0
4	安峰	中山大学中山医学院法医病理学教研室	4	19	3.0	4.0