人类疱疹病毒8型肿瘤转化基因K12的分离及在昆虫细胞中的表达

• 作者: 卢春 朱建中
• 来源期刊: 南京医科大学学报(自然科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 人类疱疹病毒8型 肿瘤转化基因K12 杆状病毒表达载体
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 425-428
• 页数: 5页
• 分类号: R373.1+1|Q785
• 字数: 3073字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2003.05.001

摘要

目的:分离人类疱疹病毒8型(HHV-8)肿瘤转化基因K12,克隆至杆状病毒载体并在昆虫细胞中作尝试性表达.方法:设计一对引物,在引物的5′端分别引入BamHI、EcoRI酶切位点,以佛波脂刺激的原发性渗出性淋巴瘤(PEL)细胞系BCBL-1细胞总DNA为模板,PCR扩增HHV-8肿瘤转化基因K12.将经序列测定后的PCR产物克隆进杆状病毒转移载体pVL1393中,构建成重组K12杆状病毒转移载体pVL-K12,并与线性BaculoGold病毒DNA共转染昆虫细胞Sf9,获得重组病毒.RT-PCR检测K12 mRNA转录水平;间接免疫荧光染色(IFA)检测K12编码蛋白在Sf9细胞中的表达状况.结果:含HHV-8 K12基因重组杆状病毒在昆虫细胞Sf9中获得表达,经IFA证实该重组蛋白为HHV-8特异性蛋白.结论:杆状病毒载体能够介导HHV-8肿瘤转化基因K12编码的蛋白在昆虫细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢春	南京医科大学微生物学与免疫学系	92	236	7.0	9.0
2	朱建中	南京医科大学微生物学与免疫学系	20	192	9.0	13.0