骨髓间质干细胞绿色荧光蛋白基因的转染和克隆化研究

• 作者: 孙晓春 张锡然 朱伟 胡嘉波 许文荣 钱晖 陈永昌 韩崇旭
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 转染 间质干细胞
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 267-269
• 页数: 3页
• 分类号: R446.4
• 字数: 1891字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-764X.2003.05.005

摘要

目的建立能稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)并连续传代培养的骨髓间质干细胞(MSCs)株.方法采用电穿孔法将带有GFP的质粒(pGFP-N1)在不同条件下转染MSCs,经过G418筛选,有限稀释法筛选阳性克隆,荧光显微镜及流式细胞仪检测GFP的表达情况.结果电穿孔以电容量1050 μF、电压260 V时效果最好,转染GFP的MSCs能在含有G418的培养基中生长,未转染的骨髓间质干细胞不断死亡.转染24 h后即能观察到少量荧光细胞,一个月后大部分荧光细胞呈集落样生长,荧光表达较强,转染率为50%～60%.体外克隆后,能稳定表达至10代,10代后荧光强度明显减弱.结论 GFP基因能在MSCs中进行有效的复制、转录和翻译,并可持续、稳定、高效表达;转染GFP的MSCs能作为研究MSCs的诱导分化及生物细胞工程治疗的载体细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张锡然	南京师范大学生命科学院	90	576	11.0	21.0
2	朱伟	江苏大学医学技术学院	121	743	14.0	21.0
3	许文荣	江苏大学医学技术学院	156	795	13.0	20.0
5	孙晓春	江苏大学医学技术学院	47	338	11.0	16.0
6	钱晖	江苏大学医学技术学院	88	346	9.0	14.0
7	胡嘉波	江苏大学医学技术学院	65	440	11.0	17.0
8	陈永昌	江苏大学医学技术学院	59	228	8.0	11.0
11	韩崇旭	南京师范大学生命科学院	3	20	3.0	3.0