结核分支杆菌Ag85B蛋白在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 吴雪琼 张俊仙 张灵霞 郑越
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白 Ag85B 基因表达 克隆 分支杆菌,结核
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 487-488
• 页数: 2页
• 分类号: R51
• 字数: 2523字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2003.05.015

摘要

目的通过结核分支杆菌Ag85B基因在大肠杆菌中的表达,获得大量纯化的重组Ag85B(rAg85B)蛋白.方法应用PCR技术扩增结核分支杆菌H37RvAg85B DNA序列;以质粒pET24b为表达载体,构建Ag85B重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21(DE3);以IPTG诱导转化子,通过SDS-PAGE电泳鉴定rAg85B的表达水平,采用Novagen公司生产的His.Bind蛋白纯化试剂盒纯化rAg85B蛋白.结果重组质粒pET24b-Ag85B测序表明与报道的序列相同.它在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的30%左右.纯化后的rAg85B样品经SDS-PAGE和光密度扫描分析表明其纯度约为95%左右,每100 ml培养菌可获得10 mg左右纯化的重组蛋白.结论 pET24b-Ag85B大肠杆菌工程菌株能高效表达rAg85B蛋白,大量纯化的rAg85B为其进一步的研究与应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑越	中国人民解放军第三○九医院结核病研究室	8	28	3.0	5.0
2	吴雪琼	中国人民解放军第三○九医院结核病研究室	31	111	6.0	8.0
3	张灵霞	中国人民解放军第三○九医院结核病研究室	32	106	5.0	8.0
4	张俊仙	中国人民解放军第三○九医院结核病研究室	11	60	5.0	7.0