结核分枝杆菌Ag85B-MPT64融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 朱道银 江山 蒋英 陈全 骆旭东
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 Ag85B MPT64 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 217-219
• 页数: 3页
• 分类号: R378.91
• 字数: 2203字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.03.014

摘要

目的构建结核分枝杆菌早期分泌蛋白Ag85B和MPT64融合基因(AM)及其原核表达质粒并进行表达.方法采用gene SOEing法将 ag85b和mpt64用疏水甘氨酸接头(Gly4Ser)3融合,经限制性内切酶切后克隆入原核表达载体pET32a中,进行酶切、PCR鉴定和DNA序列测定.将重组质粒转染Ecoli.BL21,经过IPTG诱导后其表达产物进行SDS-PAGE和免疫印迹分析.结果 AM融合基因定向克隆入pET32a中,双向测序验证碱基突变率为0.11%(2/1707),均为无意义突变.SDS-PAGE和免疫印迹分析结果均显示在约73kDa的位置可见明显的蛋白条带.结论成功地构建了ag85b-mpt64融合基因及其原核表达质粒,重组质粒能够在大肠杆菌在中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	骆旭东	重庆医科大学微生物教研室	34	208	9.0	12.0
2	朱道银	重庆医科大学微生物教研室	113	510	10.0	15.0
3	陈全	重庆医科大学微生物教研室	58	230	9.0	11.0
4	蒋英	重庆医科大学微生物教研室	28	175	8.0	11.0
5	江山	重庆医科大学微生物教研室	29	181	8.0	11.0