基于分子信标实时监测大肠杆菌DNA连接酶催化的DNA连接过程

• 作者: 刘凌凤 唐志文 孟祥贤 李军 李杜 王柯敏 谭蔚泓 郭秋平 黄杉生
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: E.coli DNA连接酶 核酸连接 分子信标 实时监测
• 年，卷（期）: 2003,（10）
• 页码范围: 1761-1764
• 页数: 4页
• 分类号: Q55
• 字数: 2756字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0251-0790.2003.10.004

摘要

报道了一种对DNA连接过程进行实时监测的方法, 利用分子信标核酸探针作为DNA连接反应的模板和检测探针, 实时监测了E.coli DNA连接酶催化的DNA连接反应, 克服了传统的凝胶电泳技术操作复杂、周期长及无法实时监测DNA连接过程的缺点, 为核酸连接过程的实时监测和连接酶催化机理的研究提供了更为丰富的信息. 在此基础上, 发展了一种快速、准确测定E.coli DNA连接酶的方法, 线性响应范围为4.0×10-6～2.0×10-4 U/μL, 检测下限为4.0×10-6 U/μL.