HCV脱氧核酶在表达荧光素酶HepG2细胞中的活性

• 作者: 于乐成 毛青 王升启 王宇明 陈忠斌 顾长海
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 脱氧核酶 肝炎病毒,丙型 5′-非编码区 荧光素酶 基因治疗
• 年，卷（期）: 2003,（10）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 870-873
• 页数: 4页
• 分类号: R373.21|R394.2
• 字数: 3292字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2003.10.010

摘要

目的对丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus, HCV)5′-非编码区(5′-Noncoding region, 5′-NCR)靶向性脱氧核酶(Deoxyribozymes, DRz)在靶基因调控性荧光素酶表达HepG2细胞中的活性进行评价.方法根据HCV 5′-NCR中符合5′…Y↓R…3′(Y=A/G,R=U/C)特征的位点及5′-NCR的二级结构选择靶位,采用10-23 DRz 基序,设计并合成HCV靶向性脱氧核酶DRz-232、DRz-127、DRz-84、DRz1以及两端被硫代修饰的DRz(Phosphorothioate deoxyribozymes, TDRz)和活性中心区人工突变的硫代DRz(Mutant phosphorothioate DRz, MDRz).直接将其加入体外培养的受HCV 5′-NCR调控的表达荧光素酶HepG2细胞(HepG 2.9 706细胞株)中,或用脂质体转染法将其导入靶细胞.用化学发光法检测荧光素酶活性,计算抑制率.结果转染终浓度为0.5 μmol/L的药物24 h后,DRz-232/TDRz-232、DRz-127/TDRz-127、DRz-84/TDRz-84和DRz1/TDRz1的抑制率分别约14.3%/14.9%、53.2%/50.6%、25.6%/23.8%和44.7%/43.3%,均高于对应的MRz,其中DRz-127/TDRz-127与MRz-127(41.2%)相比抑制率有显著性差别(P＜0.05).直接将TDRz-127或MRz-127加入细胞培养体系中被动作用5 h和24 h,抑制率无明显差别,但均显著低于脂质体转染组.结论靶位合适的特异性脱氧核酶在靶基因调控性荧光素酶表达细胞中对HCV 5′-NCR可能同时具有反义抑制和剪切作用;应用脂质体转染将药物导入细胞内显著优于直接加药的效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宇明	第三军医大学附属西南医院全军感染病研究所	299	2460	25.0	35.0
2	王升启	军事医学科学院放射医学研究所	315	3297	28.0	41.0
3	于乐成	第三军医大学附属西南医院全军感染病研究所	21	175	7.0	13.0
4	顾长海	第三军医大学附属西南医院全军感染病研究所	58	586	13.0	23.0
5	毛青	第三军医大学附属西南医院全军感染病研究所	83	493	12.0	17.0
6	陈忠斌	军事医学科学院放射医学研究所	25	293	10.0	16.0