抗栓肽和尿激酶原(B链)嵌合体的构建与表达

• 作者: 俞梅敏 姜靓靓 张磊亮 管胜昔 茹炳根
• 来源期刊: 北京大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 尿激酶原 抗栓肽 质粒稳定性 血小板聚集
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 页码范围: 588-593
• 页数: 6页
• 分类号: Q51
• 字数: 3095字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0479-8023.2004.04.014

摘要

通过基因工程重组技术,将抗栓肽(decorsin)基因与尿激酶的B链即scu-PA(B)基因用柔性Linker((Gly 4Ser)3)融合在一起,构建新的嵌合体基因dscuPA(B),在大肠杆菌R osetta(DE3)plysS中通过IPTG诱导表达, 并考察了重组质粒在Rosetta(DE3)plysS在传代中的分离稳定性.该融合蛋白在大肠杆菌中是以包涵体的形式存在,对包涵体进行变性及复性后,并通过Zn 2+ 螯合柱和SP阳离子交换柱进行纯化.质谱分析表明分子量为33.735 kD,与理论值相符.目的蛋白质的纯度可达90%.纤维蛋白平板法测得嵌合分子的比活为90000IU/mg ,与scuPA-32k的比活相近.体外血小板聚集实验表明融合蛋白有较强的抑制血小板聚集的功能,抑制常数IC50为0.31μmol/L.以上这些结果表明,该融合蛋白不但具有较强的溶栓功能,而且具有抗栓功能,可能是一种具有很好发展前景的双功能溶栓抗栓药物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	茹炳根	北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室	102	1233	20.0	29.0
2	俞梅敏	北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室	20	260	9.0	16.0
3	张磊亮	北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室	2	6	1.0	2.0
4	管胜昔	北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	姜靓靓	北京大学生命科学学院蛋白质工程国家重点实验室	1	0	0.0	0.0