人可溶性转化生长因子βⅡ型受体真核表达载体的构建及表达

• 作者: 史丽云 姚航平 张立煌 杨小华 郁子扬
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 受体,转化生长因子β 真核细胞 pCDNA3.1/myc-his(-)B,转染,CHO细胞 重组,遗传
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 504-508
• 页数: 5页
• 分类号: R392.13
• 字数: 3236字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2004.06.008

摘要

目的:构建人转化生长因子βⅡ型受体胞外区(sTGFβRⅡ)基因的真核表达载体,转染真核细胞CHO以表达sTGFβRⅡ蛋白,并检测其生物学活性.方法:以TGFβRⅡ的重组质粒为模板,用PCR方法扩增得到人TGFβRⅡ胞外区(1-159位氨基酸)的cDNA,将该cDNA重组到真核表达载体pCDNA3.1/myc-his(-)B(pCDNA)的EcoRⅠ和HindⅢ多克隆位点上,构建成pCDNA-sTGFβRⅡ重组质粒.经双酶切和核酸测序鉴定,将该重组质粒转染CHO细胞,用Western blotting法检测sTGFβRⅡ的表达,并测定其生物学活性.结果:CHO细胞转染pCDNA-sTGFβRⅡ重组质粒后,其培养上清经 Western blotting分析,显示有特异性的蛋白条带,所表达的蛋白能明显抑制TGFβ1对貂肺上皮细胞的增殖抑制作用.结论:成功克隆了sTGFβRⅡ基因,并获得有生物学活性的sTGFβRⅡ蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张立煌	浙江大学医学院免疫学研究所	40	472	14.0	20.0
2	史丽云	浙江大学医学院免疫学研究所	3	8	2.0	2.0
3	郁子扬	浙江大学医学院免疫学研究所	4	9	2.0	3.0
4	杨小华	浙江大学医学院免疫学研究所	3	2	1.0	1.0
5	姚航平		5	92	3.0	5.0