人可溶性肿瘤坏死因子α受体真核表达载体pcDNA3.1(+)/sTNFR的构建

• 作者: 张蕴惠 徐艳 章锦才
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人可溶性肿瘤坏死因子α受体 真核载体 质粒
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 专栏论著
• 页码范围: 335-337
• 页数: 3页
• 分类号: R781.4
• 字数: 2456字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1182.2005.04.020

摘要

目的构建人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFR)真核表达载体pcDNA3.1(+)/sTNFR,为研究人sTNFR在哺乳动物细胞中的合成与表达提供条件.方法采用体外重组技术,将sTNFR的RT-PCR纯化产物及质粒pcDNA3.1(+)DNA经kpnⅠ和xhoⅠ双酶切、胶回收纯化酶切片段后,体外连接这两个酶切片段进行定向重组,再将重组DNA转化感受态细胞E.Coli Competent Cells JM109.复苏后,在含氨苄青霉素的LB固体培养基上筛选阳性克隆,进行酶切及测序鉴定.结果挑取的LB固体培养基上的6个单菌落经证实均为阳性克隆,即sTNFR与pcDNA3.1(+)体外重组成功.结论将sTNFR cDNA成功地插入了真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建了质粒pcDNA3.1(+)/sTNFR.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章锦才	广东省口腔医院口腔内科	113	615	12.0	18.0
2	徐艳	南京医科大学口腔医院口腔内科	84	297	9.0	13.0
3	张蕴惠	四川大学华西口腔医院牙周病科	52	323	9.0	15.0