胃癌相关基因GCRG213在大肠杆菌中的表达及重组蛋白纯化

• 作者: 伍银桥 吴本俨 尤纬缔 王刚石 王卫华 王孟薇
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胃肿瘤 基因,CRG213 融合蛋白 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 406-408
• 页数: 3页
• 分类号: R392.7
• 字数: 2704字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2004.05.011

摘要

目的利用硫氧还蛋白融合表达系统表达胃癌相关基因GCRG213,制备高纯度的GCRG213蛋白.方法采用PCR技术从pGEM-T质粒上扩增出含完整ORF的GCRG213 cDNA序列,将其克隆至硫氧还蛋白融合表达载体pET102/D-TOPO中,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达融合蛋白,凝胶回收目的蛋白.结果 SDS-PAGE证实在大肠杆菌中高效表达出相对分子量约29.4kD的Thioredoxin/GCRG213融合蛋白.薄层凝胶扫描显示,其表达量占菌体总蛋白的28.7%.经凝胶回收法得到纯度近100%的蛋白产品.结论在大肠杆菌中成功表达了Thioredoxin/GCRG213融合蛋白,并制备出高纯度蛋白产品,为后续的功能研究及其抗体研制奠定了基础.