重组腺病毒Ad-HGF体外感染成纤维细胞后转染效率及表达的检测

• 作者: 劳妙芬 吴祖泽 哈小琴 王澜
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 腺病毒 转染 表达 成纤维细胞 肝细胞生长因子
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 2817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2004.01.003

摘要

检测携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒Ad-HGF在体外对成纤维细胞的感染效率以及感染细胞对目的蛋白的表达.以不同感染复数(m.o.i.)(25,50,100,200)的Ad-GFP感染NIH3T3细胞,48 h时用流式细胞仪检测转染效率;以50 m.o.i.感染NIH3T3细胞后48 h,用ELISA和Western印迹杂交法分别检测感染上清中HGF的表达.分别以50 m.o.i.的Ad-GFP和Ad-HGF感染原代培养人瘢痕成纤维细胞,以检测重组腺病毒对原代培养人瘢痕成纤维细胞的转染效率和其对HGF的表达.结果表明,当m.o.i.为50时,重组腺病毒对NIH3T3细胞的转染效率已达95%以上;HGF的表达量可达每2×]06细胞249 ng;并可检测到HGF蛋白的一特异杂交带.以50 m.o.i.的Ad-GFP感染原代培养人瘢痕成纤维细胞,72 h时GFP表达达高峰,此时转染效率可高达36.75%.Ad-HGF感染原代培养人瘢痕成纤维细胞后HGF的表达在72 h时达高峰,表达量可达每3.3×105细胞66 ng.初步认为重组腺病毒可有效地介导HGF基因转染正常或瘢痕成纤维细胞,且感染细胞可有效表达目的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴祖泽	军事医学科学院放射医学研究所	153	1469	18.0	31.0
2	哈小琴	军事医学科学院放射医学研究所	19	178	8.0	12.0
3	劳妙芬	军事医学科学院放射医学研究所	10	102	5.0	10.0
4	王澜	军事医学科学院放射医学研究所	9	37	3.0	5.0