增强型绿色荧光蛋白基因转染对原代培养的人软骨细胞细胞周期的影响

• 作者: 何贤辉 冯铮 史剑波 徐丽慧 曾耀英 江逊 狄静芳 王通 王青 肇静娴
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 工程,生物医学 软骨细胞 绿色荧光蛋白 基因转移技术 细胞周期
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 924-928
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 3393字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2004.06.003

摘要

目的:观察转染增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因后原代培养的人鼻中隔软骨细胞的细胞周期的变化,建立原代培养的人鼻中隔软骨细胞的示踪方法.方法:在大肠杆菌中扩增pECFP-Nl质粒,通过Amaxa细胞核转染仪将pECFO-Nl质粒转入原代培养的人鼻中隔软骨细胞,应用激光共聚焦显微镜观察其转染过程及瞬时表达情况,流式细胞仪检测其转染效率和细胞周期的变化.结果:增强型绿色荧光蛋白基因在转染24h后得到了明显表达,48h后流式细胞仪检测其表达率为35.37%,细胞周期没有明显的改变,且未影响软骨细胞的贴壁过程.结论:经pEGFP-Nl质粒转染的原代培养的人鼻中隔软骨细胞仍能在体外存活,对软骨细胞的生长没有明显的影响,pECFP-Nl是转染原代培养的人鼻中隔软骨细胞较为理想的瞬时表达载体,也是组织工程化软骨形成过程的良好示踪剂.