大肠杆菌感受态细胞转化能力的影响因素

• 作者: 张岚岚 徐昌杰 徐春燕
• 来源期刊: 细胞生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 大肠杆菌 感受态细胞 转化能力
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 429-432
• 页数: 4页
• 分类号: Q2
• 字数: 4546字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7666.2004.04.024

摘要

探讨了大肠杆菌菌株、细菌生长状态、转化溶液、抗冻剂及保存时间、质粒长度和纯度对感受态细胞转化能力的影响.结果表明,以100 mmol/L CaCl2为缓冲液,采用经活化培养的A600为0.55的TGl制备的感受态细胞,在冰上放置6h后转化,所得转化率最高,可达2×106～4×107cfu/μg DNA(pUCl9).随着质粒长度增加和纯度降低,转化率有所下降.若感受态细胞要保存备用,以15%甘油为抗冻剂优于7%DMSO,但添加抗冻剂对转化率有抑制作用.贮于甘油的感受态细胞在-70℃冻存两个月后仍有较理想的转化率.