简单高效的感受态细胞制备和质粒转化体系的建立

• 作者: 刘卫今 完迪迪 蒋勇
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 高效 感受态细胞制备 质粒转化 体系
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 2745-2746
• 页数: 2页
• 分类号: Q813
• 字数: 2175字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2008.07.029

摘要

[目的]建立重复性好的感受态细胞的快速制备方法和质粒转化方法.[方法]采用改进的氯化钙法制备感受态细胞后,将带有目标片段的质粒转入感受态细胞,使工程菌DH5a转化成具有抗氨苄青霉素的大肠杆菌,接种于添加氨苄青霉素的LB培养基上,并通过蓝白斑筛选和菌落PCR进行检测.[结果]制备的感受态细菌在不加Amp的LB平板上能较好生长,表明感受态细菌具有较强活性.感受态细菌在添加Amp的平板上不能生长,表明感受态细菌未被杂菌污染.转化后获得白色菌落1410个,转化率为1.41×10(5)cfu/μg.菌落PCR表明获得的白色菌斑为带有目标片段的阳性菌斑.[结论]该方法十分简便,是一种适于实验室操作的高效感受态细胞的制备方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘卫今	怀化学院生物工程系	23	91	6.0	7.0
2	蒋勇	怀化学院生物工程系	2	13	2.0	2.0
3	完迪迪	怀化学院生物工程系	2	15	2.0	2.0