蛋白酶抗性人睫状神经营养因子突变体基因的构建及其在巴斯德毕赤酵母中的表达

• 作者: 刘志敏 张伟 朱厚础 熊向华 薛冲 赵洪亮
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 睫状神经营养因子 巴斯德毕赤酵母 蛋白酶抗性
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 蛋白质工程
• 页码范围: 394-397
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2699字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.03.016

摘要

AX15是一种比天然睫状神经营养因子具有更高的生物学活性、更好的稳定性和可溶性的hCNTF突变体.在巴斯德毕赤酵母中表达时AX15易发生降解.氨基酸序列分析表明降解位于由12和13位氨基酸残基组成的双碱性氨基酸之后.根据KEX2蛋白酶的底物专一性把双碱性氨基酸从RR变为RK,构建了KEX2抗性的AX15突变体AX15(R13K).AX15(R13K)的稳定性得到了显著的提高,在诱导100 h后也未发生降解.利用超滤浓缩和凝胶过滤得到了纯度＞90%的AX15(R13K).TF-1细胞存活实验表明AX15(R13K)具有与AX15相同的生物学活性.蛋白酶抗性人睫状神经营养因子突变体可能具有更好的体内稳定性,在临床应用上具有潜在的优势.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱厚础	军事医学科学院生物工程研究所	27	296	10.0	16.0
2	张伟	军事医学科学院生物工程研究所	70	657	13.0	23.0
3	刘志敏	军事医学科学院生物工程研究所	55	823	12.0	28.0
4	熊向华	军事医学科学院生物工程研究所	46	135	6.0	9.0
5	赵洪亮	军事医学科学院生物工程研究所	23	169	7.0	12.0
6	薛冲	军事医学科学院生物工程研究所	31	231	7.0	14.0