大鼠肾胆绿素还原酶 cDNA克隆、表达及鉴定

• 作者: 刘明 吕昌莲 周虹 孙建平 王秀宏
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 胆绿素还原酶 胆绿素 胆红素 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 21-25
• 页数: 5页
• 分类号: Q81|Q781
• 字数: 3107字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2004.01.007

摘要

目的克隆大鼠肾胆绿素还原酶(BVR)的cDNA序列后在大肠杆菌中表达、纯化并进行鉴定.方法采用RT-PCR方法利用设计合成的一对特异性引物从大鼠肾组织扩增BVR的cDNA序列,构建pMW172a-BVR重组质粒,转化扩增后进行序列测定,证实同GenBank [053850]公布的大鼠肾BVR的cDNA序列相同后,阳性重组质粒转化到E.coli BL21(DE3)中表达并进行纯化.结果 SDS-PAGE鉴定其分子量为33 ku,分光光度仪检测具有催化胆绿素还原为胆红素的活性,证实为胆绿素还原酶.实验还测定了Km值,以NADH和NADPH分别作供氢体,测得Km值分别是380 μmol/L、3.5 μmol/L.结论通过克隆表达获得了有活性的大鼠BVR酶蛋白,为进一步研究BVR的性质及功能奠定了基础,也为血红素加氧酶的研究提供了便利条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周虹	军事医学科学院野战输血研究所	69	379	10.0	14.0
2	孙建平	哈尔滨医科大学药学院	31	304	9.0	17.0
3	吕昌莲	军事医学科学院野战输血研究所	13	101	5.0	9.0
5	刘明	军事医学科学院野战输血研究所	16	113	7.0	10.0
9	王秀宏	哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室	15	55	4.0	6.0