丙型肝炎病毒NS3基因酵母表达载体构建及表达

• 作者: 刘妍 张玲霞 成军 李克 李莉 段惠娟 王琳 陆荫英
• 来源期刊: 中华传染病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: C型肝炎样病毒属 病毒非结构蛋白质类 酵母菌 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-15
• 页数: 3页
• 分类号: R575
• 字数: 2405字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1000-6680.2004.01.003

摘要

目的为探讨丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3的功能,在真核生物酵母细胞中表达HCV NS3基因.方法用聚合酶链反应(PCR)的方法以HCV全长质粒pBRTM/HCV-1为模板扩增HCV NS3基因,克隆到pGEM-T载体中,双酶切后回收连接到酵母表达质粒pGBKT7中表达.提取酵母蛋白质,进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western免疫印迹分析.结果成功构建HCV NS3基因酵母表达载体,Western免疫印迹显示了HCV NS3在酵母细胞中表达.表达产物在胞内存在,相对分子质量为70 000.结论HCV NS3蛋白在酵母中表达成功.